本文標(biāo)題:"破碎細(xì)胞-細(xì)胞壁觀察的實(shí)驗(yàn)方法-生物切片顯微鏡"
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破碎細(xì)胞-細(xì)胞壁觀察的實(shí)驗(yàn)方法-生物切片顯微鏡
為了避免以后去除助濾劑的底煩,使用離心法從冷卻的
發(fā)酵液中收得生物量,然后洗滌微生物,并經(jīng)洗滌去除培養(yǎng)
基成分。按照微生物的特性,選擇不同方法破碎細(xì)胞。球磨
法是破碎大多數(shù)微生物細(xì)胞的極好方法。球磨法是在快速振
蕩容器中,用許多小玻璃球與細(xì)胞共同振蕩。超聲波、凍
融,在高壓下迫使細(xì)胞懸液通過(guò)一個(gè)小孔而實(shí)現(xiàn)的液切法,
以及用酶處理以去除細(xì)胞壁等細(xì)胞破碎方法,
在各種體系中均有各自的用途。細(xì)胞碎片可由離心法
去除,核酸可用酶水解或用高分子量的陽(yáng)離子化合物如聚乙
烯亞胺或硫酸鏈霉素沉淀去除。白于還存在許多其他蛋白
質(zhì),因此使用層析法進(jìn)一步純化往在是必不可少的。因?yàn)檫@
些純化過(guò)程復(fù)雜,耗費(fèi)又高,所以要盡盤避免純化,并盡量
利用固定在細(xì)胞內(nèi)的胞內(nèi)酶。
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