本文標(biāo)題："DNA制備實(shí)驗(yàn)需要使用好幾種技術(shù)-生物顯微鏡"
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DNA制備實(shí)驗(yàn)需要使用好幾種技術(shù)-生物顯微鏡
核酸的放射性標(biāo)記
許多實(shí)驗(yàn)需要使用放射性核酸，可采用好幾種技術(shù)，通過讓細(xì)
胞生長在放射性培養(yǎng)基中來標(biāo)記生物分子，所依據(jù)的基本原理是
在可能的情況下于培養(yǎng)基中加入一種唯一能進(jìn)入所研究分子的前
體，對(duì)DNA來說這并不復(fù)雜，因?yàn)樾叵汆奏ず托剀罩荒苡糜贒NA的
合成，因此，如果把胸苷或胸苷放入培養(yǎng)基中，新復(fù)制的DNA將
分別含有這是制備放射性DNA最常用的方法，有時(shí)需要的放射懷
比由放射性胸苷所提供的量要更大時(shí)，那么就使用以形式加入，
但是，在這樣做的時(shí)候，DNA和RNA以及其他含磷化合物都被標(biāo)記
上了，如果只奇想放射性DNA，可以用如前所述的RNe或烯堿處理
標(biāo)記的細(xì)胞，水解除去RNA，然后只須將DNA分子與游離的RNA核
苷酸分離，有好幾種簡單方法可做以這點(diǎn)。
對(duì)RNA唯一獨(dú)特的物質(zhì)是核酸，但是，如果把放射性核糖加入培
養(yǎng)基中，它會(huì)被代謝，幾乎所有的含碳化合物中都會(huì)出現(xiàn)標(biāo)記，
最好的前體是尿苷或尿苷，它可轉(zhuǎn)變灰尿苷三磷酸，然后聚合到
RNA中，但是，有些尿苷轉(zhuǎn)變?yōu)閁TP,它再甲基產(chǎn)生胸苷三磷酸，
然后聚合到，因此用處理細(xì)胞抽取液來水解除去DNA，RNA也可以
用P標(biāo)記，最后一步必須用除去DNA。
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