本文標(biāo)題："熒光光度分析儀器檢測(cè)水中含浮游植物的步驟"

熒光光度分析儀器檢測(cè)水中含浮游植物的步驟

熒光光度分析法
(In Vitro Determination of Chlorophyll a and Pheophytin a in M??arine and Freshwater Algae by Fluresence)步驟為：
首先先確定所有采樣器具需無(wú)殘留酸化的物質(zhì)，取定量的水樣體積(依水樣的顆粒多寡而定，
過(guò)濾后濾??紙需呈現(xiàn)淡綠或褐色(外海常需過(guò)濾達(dá)四公升水樣，因浮游植物較稀少；
內(nèi)陸或湖泊則可降低至一公升以下)，
 
以低壓(不超過(guò)6 in Hg 即20 KPa)抽氣幫浦過(guò)濾(時(shí)間不得超過(guò)10分鐘，否則容易破壞細(xì)胞降低葉綠素測(cè)值)
至玻璃纖維濾紙上，但是不要使用幫埔將濾紙上水樣完全抽干。

以鑷子將濾紙移離開(kāi)過(guò)濾器，將之折疊，含有顆粒物質(zhì)的那面在內(nèi)側(cè)，用吸紙輕輕吸取濾紙上過(guò)多的水分，
將濾紙放在培養(yǎng)皿(petri dish) 或其他適合的容器內(nèi)，若不立即進(jìn)行萃取，用鋁箔紙將容器包裹以避光，
儲(chǔ)存于-20℃或-70℃的冰箱中，若儲(chǔ)存于冰塊中，2至4小時(shí)內(nèi)仍可行，于-20℃的環(huán)境下儲(chǔ)存不得超過(guò)31/2星期。

萃取過(guò)程中，為方便萃取，將濾紙浸泡在90%丙酮冰箱內(nèi)2小時(shí)以上，但不超過(guò)24小時(shí)，將濾紙移出冰箱，
置于黑暗處回溫。將均質(zhì)機(jī)組合好，含水、含丙酮的洗滌瓶準(zhǔn)備在側(cè)，工作平臺(tái)上的光線盡可能調(diào)暗。
將濾紙自容器中取出，剪成小片狀，放入玻璃研磨管內(nèi)，以玻棒將之推至研磨管底，加入4 mL 90%丙酮
(丙酮：水= 9：1)，以500 rpm研磨1分鐘，將濾紙片研磨成泥，需注意研磨過(guò)程不可過(guò)熱。

將濾紙泥移入15 m??L具螺旋蓋的離心管，再用6 mL的90%丙酮(丙酮：水= 9：1)，清洗附在旋轉(zhuǎn)杵、及管內(nèi)的殘留物，
此清洗液也注入含濾紙泥的離心管內(nèi)，蓋上螺旋蓋，震蕩之，將之置于黑暗，直到進(jìn)行下ㄧ步驟。
研磨下一張濾紙前，用丙酮、用水清洗旋轉(zhuǎn)杵、研磨管及玻棒，為降低試劑級(jí)的溶劑使用，
可先用水龍頭水清洗后，再用丙酮潤(rùn)濕；空白試驗(yàn)的濾紙留至最后研磨。以675g離心15分鐘或1000g 離心5分鐘。
取其上澄液。
熒光光度計(jì)須依賴分光光度計(jì)校正，故校正與檢量線的制作不同，而套用的方程式也不一樣

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